高效逆流色谱HPCCC的常见概念(一)
1. 洗脱出峰时间t
如果您一旦知道了目标化合物的分配系数和在两相溶剂体系中的固定相保留因子,您可以通过下面的公式计算出任意目标化合物的洗脱出峰时间
这里 VC 是螺旋柱(管)体积, F 是流动相MP流速, Sf 是固定相保留因子(作为一个系数) , D 是分配系数. 无论样品负载量是多少,用这种规格的柱子,目标化合物总是在同一时间里被洗脱出峰。因此,在分配系统确定后,就非常容易预测洗脱出峰时间。
2. 出峰顺序
下图显示化合物的理论洗脱出峰顺序与分配系数D的关系 如果化合物的分配系数较低(即<1),在流动相中的浓度要高于在固定相中的浓度,则出峰速度快。如果化合物的分配系数较高(即>1),在固定相中的浓度要高于在流动相中的浓度,则出峰速度慢。接下来,我们可以利用这一特性来解释并预测任意级别的分离纯化过程的出峰顺序。
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